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簡(jiǎn)要描述:liposomes脂質(zhì)體15ml (1x10 ml + 1x5 ml),氯磷酸-脂質(zhì)體(Clodronate liposomes)復(fù)合物。在脂質(zhì)體的形成過(guò)程中氯磷酸通過(guò)溶解在水溶液中被包裹進(jìn)磷脂雙分子層之間的水相中。
巨噬細(xì)胞清除原理。包裹著氯磷酸(方塊)的脂質(zhì)體通過(guò)巨噬細(xì)胞的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,與溶酶體(L)融合后,在磷脂酶(箭頭)的作用下,釋放出氯磷酸,當(dāng)細(xì)胞內(nèi)氯磷酸的濃度達(dá)到一定濃度,就會(huì)對(duì)巨噬細(xì)胞造成不可逆轉(zhuǎn)的損害,從而迫使其進(jìn)入細(xì)胞凋亡。
liposomes脂質(zhì)體15ml (1x10 ml + 1x5 ml)產(chǎn)品性質(zhì):
1ml脂質(zhì)體體懸液中所含的氯磷酸大約為5mg。所用的磷酸鹽緩沖液為10mMNa2HPO4,10mMNaH2PO4,140mMNaCl。
脂質(zhì)體體內(nèi)注射:
隔日尾靜脈注射200μl Clodronate liposome,根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求制定注射日程。通過(guò)免疫組化或流式檢測(cè)巨噬細(xì)胞去除效率。
liposomes脂質(zhì)體15ml (1x10 ml + 1x5 ml)尾靜脈注射方法:
(1)將小鼠放在倒扣的飯盒內(nèi),從孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2條動(dòng)脈和3條靜脈,2條動(dòng)脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面,3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側(cè)的靜脈;
(2)將紗布浸泡于約70度的溫水中,拿出后包裹尾巴,以達(dá)到使尾部血管擴(kuò)張及軟化表皮角質(zhì)的目的;
(3)行尾部靜脈注射時(shí),以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出約2cm一段,使皮膚緊張,靜脈更為充盈,右手持1ml針頭注射器,使針頭與靜脈平行(小于30°角),從尾巴的下1/4處進(jìn)針,開(kāi)始注入藥物時(shí)應(yīng)緩慢,仔細(xì)觀(guān)察,如果無(wú)阻力,無(wú)白色皮丘出現(xiàn),說(shuō)明已刺入血管,可正式注入藥物。
(4)有的實(shí)驗(yàn)需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥,注射部位應(yīng)盡可能從尾端開(kāi)始,按次序向尾根部移動(dòng),更換血管位置注射給藥。拔出針頭后,用棉球按住注射部位輕壓1-2min,止血。
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