核酸凝膠染料使用中需要注意的一些問(wèn)題
核酸凝膠染料是目前市場(chǎng)中靈敏的凝膠核酸染料
穩(wěn)定性*
可以使用微波爐加熱,可以在室溫下保存
更安全
試驗(yàn)結(jié)果表明,該染料的誘變性遠(yuǎn)小于溴化乙錠(EB)
廣泛的適應(yīng)性
適用于預(yù)制凝膠和凝膠電泳后染色
核酸凝膠染料染色過(guò)程簡(jiǎn)單
與EB一樣,在預(yù)制膠和電泳過(guò)程中不必?fù)?dān)心染料降解;而電泳后染色過(guò)程也只需30分鐘且無(wú)需脫色或沖洗
對(duì)DNA和RNA的遷移影響極小
對(duì)核酸遷移的影響小
核酸凝膠染料注意事項(xiàng):
(1)此方法染色染料用量相對(duì)較少。500μL染料大約可以做100塊50mL的膠。
(2)由于SolargelRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將SolargelRed儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。gelred兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
(3)如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認(rèn)問(wèn)題是否與染料有關(guān)。如果染色后問(wèn)題依舊存在,則說(shuō)明問(wèn)題與染料無(wú)關(guān),請(qǐng)嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長(zhǎng)的凝膠;延長(zhǎng)凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰;改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。
(4)此方法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠,對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。